抗缪勒氏管激素Ⅱ型受体(anti-Müllerian hormone receptor Ⅱ, Amhr2)是抗缪勒氏管激素(anti-Müllerian hormone, Amh)的特异受体。amhr2基因在鱼类性腺分化和发育中发挥重要作用, 更决定了有的鱼种的性别, 然而, 相关功能研究较为有限。本研究旨在明晰amhr2在我国重要海水养殖鱼类—牙鲆(Paralichthys olivaceus)性腺分化和发育过程中的表达特征, 并初步探究其功能。首先, 克隆了牙鲆amhr2-CDS序列, 共1536bp, 编码511个氨基酸。系统发育分析显示牙鲆Amhr2近C端较为保守, 与其他硬骨鱼类聚为一枝, 并与上游sp1以及下游的prr13和PCBP2在基因组中共定位。蛋白结构分析显示, 牙鲆Amhr2包含信号肽、跨膜结构域和保守的酪氨酸蛋白激酶结构域。进而, 利用实时荧光定量PCR (qPCR)分析表明, 牙鲆amhr2主要表达于性腺, 且在精巢中的表达极显著高于卵巢(P< 0.01), 其在I-V期精巢中持续高表达, 而在卵巢中仅在I期高表达, 后显著下降(P< 0.05)。性腺分化期基因的表达, 是对雌核发育组(对照组, 20 ± 0.5℃, 100%雌性)与雌核发育高温诱导组(HT组, 28 ± 0.5℃, 100%雄性)鱼苗进行检测的, amhr2在对照组全长(total length, TL)2cm的实验鱼性腺中表达最高, 后逐渐下降; 而HT组实验鱼性腺中的表达呈现先上升后下降的趋势, 并在精巢开始分化的6cm TL时表达最高。利用Hela细胞进行亚细胞定位分析发现, Amhr2与其配体Amh均定位于细胞质。同时, 通过原核表达重组牙鲆Amh, 并用其孵育离体性腺组织, qPCR分析显示精巢中amhr2的表达没有显著变化, 但卵巢中表达显著上升(P< 0.05)。进一步通过双荧光素酶报告分析表明, Amh和Amhr2共转染能够显著抑制雌激素合成的关键芳香化酶基因cyp19a的表达(P< 0.01)。综上所述, 牙鲆amhr2主要表达于精巢, 但在不同性腺发育时期表达不同, 且其可能与Amh共同影响cyp19a的转录, 对雄性表型形成的启动和性腺发育起作用。